A Educação Ambiental é contemplada e citada, direta ou indiretamente, em diversos documentos educacionais oficiais brasileiros como a Lei de Diretrizes e Bases da Educação Nacional (LDB), Parâmetros Curriculares Nacionais (PCNs), Diretrizes Curriculares Nacionais da Educação Básica, Base Nacional Comum Curricular (BNCC) e Política Nacional de Educação Ambiental. Porém, o desenvolvimento da EA no ensino médio, representado na forma de projetos ou atividades ainda é baixo quando comparado com as propostas direcionadas ao ensino fundamental. Como o ensino médio apresenta uma densa quantidade de conteúdos programáticos e uma preocupação com as provas de vestibulares e ENEM no fim deste ciclo, os professores encontram dificuldades em planejar e até mesmo aplicar seus projetos sem prejuízo dos conteúdos. Pensando nisso e também na importância de abordar temas sobre a preservação e conservação da fauna silvestre nativa, o presente trabalho pretendeu elaborar um material de apoio aos professores de biologia do ensino médio contemplando um tema da educação ambiental e alguns conteúdos programáticos previstos nesta etapa da educação. O tema escolhido para elaborar o Guia de Atividades em Educação Ambiental foram as principais ameaças a fauna no Brasil: tráfico, caça, impacto das estradas, perda de habitat, poluição e introdução de espécies exóticas. A proposta em unir a Educação Ambiental e ensino de Biologia em um Guia de Atividades, enquanto utiliza-se o ensino por investigação e promove-se a alfabetização científica resultou em um material de apoio importante para os professores de biologia do ensino médio. Em todas as atividades propostas, foram utilizados elementos que caracterizam o ensino por investigação como envolver os alunos ativamente no seu processo de aprendizagem por meio de questões e problemas, incentivá-los a investigação para a resolução das questões e problemas por meio da coleta, análise e interpretação de dados que levem à discussão e conclusão. Além disso, as atividades contidas no Guia foram elaboradas pensando em oportunizar aos estudantes momentos para a articulação de procedimentos e conhecimentos enquanto utilizam de sua capacidade crítica para julgar o que é mais apropriado na compreensão do tema investigado. De modo geral, acredita-se que a Educação Ambiental, como meio para estabelecer uma relação ética entre fauna silvestre e sociedade é fundamental para o progresso na conservação de espécies, incluindo a espécie humana, pois entende-se que a falta de consciência ambiental está intimamente associada aos crimes cometidos na área. Além disso, este modelo de atividade auxilia na promoção da emancipação e autonomia do estudante quanto a resolução de perguntas e problemas socioambientais atuais e futuros, contribuindo para uma formação cidadã mais sustentável.