O presente estudo teve por objetivo verificar as relações entre a atividade física e os profissionais ligados ao ecoturismo da região de Bonito-MS, a fim de buscar subsídios para a formação adequada dos profissionais de Educação Física, englobando as questões ambientais. Os instrumentos utilizados foram dois questionários: um para os guias de turismo e outro para os turistas, cujos dados foram tratados e interpretados. A amostra do estudo foi composta por 79 guias de turismo e 619 turistas. O instrumento de coleta de dados foi composto por oito questões para os guias de turismo e 18 questões para os turistas, a fim de identificar seus perfis. Os resultados indicaram que os guias de turismo apresentam defasagem de conhecimento em sua formação, visto que a grande maioria não possui curso superior e tiveram formação técnica insuficiente para sua atuação profissional, na área de atividade e condicionamento físicos e de Educação Ambiental. Sua formação técnica não é padronizada, realizada em diversos cursos com diferentes cargas horárias. Com relação aos turistas, boa parte encontra-se na faixa etária entre 21 e 40 anos, procuram o lazer, o turismo contemplativo e o turismo de aventura e trazem consigo a consciência ambiental. Desse grupo, uma parcela significativa não pratica atividade física, podendo sofrer durante as atividades algum tipo de lesão, que pode ser agravado pela falta de um diagnóstico prévio por parte dos guias de turismo. Conclui-se que o profissional, para estar adequadamente habilitado a atuar no ecoturismo, deve ter o seguinte perfil: conhecimento do local, suas histórias e particularidades, do desenvolvimento das atividades, de Ecologia, de Educação Ambiental, sobre saúde, atividade física e avaliação física bem como de noções de primeiro socorros. No que tange ao profissional de Educação Física, faz-se necessário a formação no que se refere aos conhecimentos técnicos do ecoturismo e os relacionados à Ecologia e uma metodologia para desenvolver a Educação Ambiental através da Educação Física integrada ao restante das disciplinas nos diferentes anos de formação, que permita formar valores e convicções da conservação do ambiente.